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離心機(jī)的相關(guān)知識(shí)介紹
更新時(shí)間:2022-07-04   點(diǎn)擊次數(shù):428次

離心機(jī)的相關(guān)知識(shí)介紹

離心機(jī)的相關(guān)知識(shí)介紹離心技術(shù)主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(細(xì)胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,從而與溶液得以分離,而沉降速度取決于顆粒的質(zhì)量、大小和密度。

●     相對(duì)離心力(RCF)

又稱(chēng)為(g)力是在離心過(guò)程中實(shí)際施加在樣品上的作用力。

RCF=1.18x離心半徑(mm)x(轉(zhuǎn)速/1000)2

   在離心過(guò)程中能夠直接設(shè)定離心力離心,可以使結(jié)果更加準(zhǔn)確、可靠,更具有科學(xué)性。

●     轉(zhuǎn)速(rpm)

通常以每分鐘多少轉(zhuǎn)來(lái)表示。相對(duì)離心力與轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速的平方成正比。因此,轉(zhuǎn)速是決定離心力的主要因素。

●     離心半徑

指轉(zhuǎn)子中軸到樣品管中心的距離,離心半徑與離心力成正比。不同的轉(zhuǎn)子具有不同的離心半徑。不同廠家相同容量的離心機(jī)轉(zhuǎn)子半徑不同,相同的轉(zhuǎn)速所得到的離心力也不同,對(duì)RCF會(huì)產(chǎn)生很大影響。

綜上所述:轉(zhuǎn)速、離心半徑均對(duì)離心力產(chǎn)生較大影響,在實(shí)際使用過(guò)程中,能夠直接設(shè)定離心力,就可以把影響降到zui小。

離心機(jī)的相關(guān)知識(shí)介紹II 離心效果                                                                    

●     離心積分

相對(duì)離心力和離心時(shí)間是決定離心效果的關(guān)鍵因素。但無(wú)法僅用這兩個(gè)參數(shù)來(lái)準(zhǔn)確衡量離心效果。使用離心積分(HRF)來(lái)衡量離心效果。

      離心積分是指離心過(guò)程中離心力對(duì)離心時(shí)間的積分。離心積分考慮了離心過(guò)程中各種影響因素對(duì)離心加速的影響,保證施加于樣品的離心力總量一致,從而保證一致的離心效果。離心積分還表明:短時(shí)間的高速離心和長(zhǎng)時(shí)間的低速離心可以獲得相同的離心效果。

● 差速離心

      差速離心法是利用樣品中各種組分的沉降系數(shù)不同而進(jìn)行分離的方法,又稱(chēng)差分離心或差級(jí)離心。通常兩個(gè)組分的沉降系數(shù)差在10倍以上時(shí)可以用此法分離。在差速離心中細(xì)胞器沉降的順序依次為:核、線(xiàn)粒體、溶酶體與過(guò)氧化物酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體、zui后為核蛋白體。沉降系數(shù)差別在一個(gè)或幾個(gè)數(shù)量級(jí)的顆粒,可以用此法分離

   差速離心首先要選擇好顆粒沉降所需的離心力和離心時(shí)間,應(yīng)用方式與學(xué)科:

   1:分步改變離心速度,用不同強(qiáng)度的離心力使具有不同密度的物質(zhì)分批分離的方法。

應(yīng)用學(xué)科:生物化學(xué)與分子生物學(xué)(一級(jí)學(xué)科);方法與技術(shù)(二級(jí)學(xué)科)

2:利用不同物質(zhì)沉降速率的差異,在不同離心速度下分離和收集不同顆粒的離心技術(shù)。常用于分離細(xì)胞勻漿中的各種細(xì)胞器。

應(yīng)用學(xué)科:細(xì)胞生物學(xué)(一級(jí)學(xué)科);細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)(二級(jí)學(xué)科)

差速離心法的優(yōu)點(diǎn)是樣品的處理量較大,用于大量樣品的初分離,可使用容量較大的轉(zhuǎn)子

III  安全離心                                                            

  操作者的安全防護(hù)

      樣品與轉(zhuǎn)子在高速離心狀態(tài)下會(huì)產(chǎn)生巨大的離心力,因此對(duì)使用者的安全保護(hù)是離心機(jī)設(shè)計(jì)的首要因素。

●     需用高強(qiáng)度材料

【1】       環(huán)氧涂層鋼制材料:抵抗各種溶劑和碎片的侵蝕。

【2】       鋼制結(jié)構(gòu),不銹鋼腔:高強(qiáng)度,抗腐蝕

【3】       盔甲電鍍:當(dāng)轉(zhuǎn)子或吊桶碎裂是,能夠起到保護(hù)腔體作用

●     不平衡保護(hù),不平衡時(shí)自動(dòng)停機(jī),自動(dòng)失衡識(shí)別。

●     轉(zhuǎn)子自動(dòng)識(shí)別【高速離心機(jī)】,超速保護(hù)。防止使用者誤操作導(dǎo)致危險(xiǎn)的發(fā)生

●     自動(dòng)平衡,無(wú)需配平

●     保證轉(zhuǎn)子高速運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)突然發(fā)生軸斷裂時(shí):

【1】       轉(zhuǎn)子不會(huì)飛出

【2】       離心力外表看不成變形

【3】       斷電后能正常開(kāi)蓋

【4】       內(nèi)腔體變形不超過(guò):3mm

【5】       離心機(jī)在試驗(yàn)臺(tái)上不發(fā)生水平位移

●     使用者需與離心機(jī)保持至少30cm的安全距離

●     溫度控制,保證生物樣品活性

離心常見(jiàn)的溫度設(shè)定為:4℃,20,  37℃ ,其中以4℃(生物零度)zui為重要,這就要求離心機(jī)具備預(yù)制冷功能、定溫啟動(dòng)功能,保證樣品一放入就處于安全溫度下離心。

離心機(jī)的相關(guān)知識(shí)介紹目前,實(shí)驗(yàn)室常用的是電動(dòng)離心機(jī)

  電動(dòng)離心機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)速度快,要注意安全,特別要防止在離心機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)期間,因不平衡或試管墊老化,而使離心機(jī)邊工作邊移動(dòng),直致從實(shí)驗(yàn)臺(tái)上掉下來(lái),或因蓋子未蓋,離心管因振動(dòng)而破裂后,玻璃碎片旋轉(zhuǎn)飛出,造成事故。因此使用離心機(jī)時(shí),必須注意以下操作:

  (1)離心機(jī)套管底部要墊棉花或試管墊。

  (2)電動(dòng)離心機(jī)如有噪音或機(jī)身振動(dòng)時(shí),應(yīng)立即切斷電源,及時(shí)排除故障。

  (3)離心管必須對(duì)稱(chēng)放入套管中,防止機(jī)身振動(dòng),若只有一支樣品管另外一支要用等質(zhì)量的水代替。

  (4)啟動(dòng)離心機(jī)時(shí),應(yīng)蓋上離心機(jī)頂蓋后,方可慢慢


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