如何選擇紫外分光光度計
紫外分光光度計廣泛用于實驗室研究。如何選購紫外分光光度計對于科研人員來說非常重要。如何選擇紫外分光光度計?
紫外分光光度計的選擇主要考慮光學結(jié)構(gòu)、光譜范圍、樣品類型和分析工具。
研究人員有許多新的紫外分光光度計可供選擇。自從60年前紫外分光光度計出現(xiàn)在實驗室的工作臺上以來,這種可以解決廣泛問題的儀器可以從單波長測量到高性能多光譜測量和分析??茖W家在選擇時需要考慮自己實驗室的需求和目的。光學結(jié)構(gòu)和光源、檢測方法、樣品類型和數(shù)據(jù)處理都是需要考慮的因素。
光學配置
一般來說,紫外分光光度計分為單光束和雙光束兩種。顧名思義,單光束型主要依靠單光束進行測量。給定波長的光束通過對照,然后通過實際樣品溶液以獲得吸光度結(jié)果。
雙光束型采用鏡面斬波輪將一束光分成兩束,分別測量對照樣品和實際樣品??梢韵薅鹊販p少光漂移(燈漂移)并減少測量時間。有些雙光型光度計不使用斬波輪,而是使用分束器將一束光分成兩束平行光束,然后同時測量對照樣品和目標樣品。由于測量速度的提高,雙光束分光光度計在測量某些溶液隨時間的動態(tài)變化的研究中非常有用。
數(shù)據(jù)管理
大多數(shù)獨立的分光光度計都包含驅(qū)動儀器操作和管理數(shù)據(jù)的軟件。高性能儀器通常與 PC 結(jié)合使用,需要制造商提供額外的軟件。同時,用戶還可以選擇升級軟件以滿足自己的需求。
另一個值得考慮的因素是數(shù)據(jù)的最終用途。每個獨立實驗室都有自己感興趣的實驗結(jié)果。例如,一些藥品機構(gòu)需要考慮美國FDA的要求和歐盟藥品評價機構(gòu)的要求,選擇不同的數(shù)據(jù)處理方式。
光源及檢測方式(LIGHT SOURCES AND DETECTION)
分光光度計的光譜也是一個需要考慮的重要因素。實驗室研究人員希望希望省錢,購買專用設(shè)備來量化核酸、蛋白質(zhì)或細菌的生長情況。
紫外分光光度計一般覆蓋190nm和380nm波長,通常使用氘燈進行照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學和半導體研究需要的光譜范圍。
有些儀器有多種光源可供選擇:紫外光、可見光甚至紅外光(780nm到3000nm)。鎢燈和鹵素燈一般只覆蓋可見光部分(約380nm到800nm)。氙氣燈可以覆蓋紫外和可見光區(qū)域。
分光光度計的帶寬很大程度上取決于單色器狹縫的寬度。可以準確地投影出實驗所需的光譜。嚴格的帶寬允許儀器對復雜混合物進行高分辨率的吸光度測量。可變單色器的狹縫寬度使分光光度計能夠滿足各種實驗需要。
為了測量吸光度值,分光光度計制造商通常使用光電倍增管(PMT)和光電二極管。 PMT 提供快速的響應時間和良好的靈敏度,并且可以調(diào)整到 UV 光譜中的特定范圍。但是一些制造商依靠光電二極管的動態(tài)范圍在幾秒鐘內(nèi)執(zhí)行所有光譜測量。
樣本格式
在大多數(shù)樣品類型中,分光光度計可以接受樣品孔、小玻璃管、比色皿、吸管和微孔板。微孔板主要是為了滿足高通量、大型實驗室的需求。但即使對于小型實驗室,廠家仍然提供各種容器轉(zhuǎn)換器來滿足吞吐量要求并減少實驗時間。
比色皿的進樣量一般從1μl到5ml不等,有的儀器配備了各種樣品夾具,以滿足各種變化的需要。體現(xiàn)靈活性。
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